細胞鋪板實驗操作技巧

    做細胞生物學實驗，細胞鋪板大概是常見的一個實驗。但是有很多人不是很得要領，鋪得不是很均勻：要么中間密周圍稀，要么周圍密中間禿頂。怎么辦呢？以下來自研域技術人員詳細解析，請收好了！

    一般96孔板，每孔是加100微升細胞懸液，從孔的左邊靠近底部加入，加完半邊板后，將未加的細胞懸液混一下再繼續加剩余的半邊板子，都加完后蓋上蓋子，左手輕輕扶住板的左邊，右手輕輕敲擊板的右邊緣，注意把握力度（一般輕巧敲三下），太強或次數太多會導致細胞集中成堆，將板順時針旋轉（逆時針效果不好），依次敲擊剩余三個邊，靜置約5分鐘，放入37度培養箱。

    6孔板、12孔板或24孔板，均可采用將個孔加入少量無血清培養基，晃動浸潤整個孔底，然后用移液槍吸至第二孔，同樣方法浸潤孔底，其它孔一次類推，這樣整個孔底都是濕潤的，細胞懸液會平鋪在整個孔底，加細胞懸液的時候可以避免加在中間，中間細胞多，而加在周邊晃勻后會出現周邊細胞多中間少的現象，細胞分散較均勻，注意加完細胞懸液后要放工作臺靜置一下。

    細胞懸液加完后，將細胞培養板抬高，對著燈光，從底部往上看，看細胞有沒有抱團。然后從底部敲擊，使之分散。如果實驗室有平板振蕩器的話，建議用這個儀器稍振蕩一下，效果不錯，振幅小，頻率高。

    細胞要盡量打散，大部分呈單個狀態。離心后，要充分懸浮。還有轉移到六孔板后，需要晃動，晃的時候不要讓細胞液轉圈，不然細胞就全被帶到中間去了，就會不均勻。
  
    一瓶細胞長滿后，正常處理，在培養瓶里吹勻，然后鋪6孔板，每孔2毫升，鋪完之后不用觀察直接用酒精棉擦拭，然后放到培養箱里，輕微的左右前后各三圈。基本上24小時之后再觀察，每孔的細胞都會很均勻。

    計算好所需要的全部液體量和細胞量，混勻后，加到六孔板里，六孔板按橫8字型晃，顯微鏡下觀察，如果不均勻，按上述方法再晃。如果細胞未計數直接種的話，在種六孔板的過程中，隨時晃一下混勻用的瓶子。 

    放在水平板面上先上下移動，再左右移動，每個方向5到6次，但關鍵的是搖晃后直接放入培養箱中，不要再做過多的運動，例如放到鏡下去看，否則很容易就又聚到中間去了。

    以上呢，就是如何把細胞鋪板鋪均勻的方法，以上技術文獻僅供參考，如您還有疑問您可來咨詢我司技術專員，為您答疑解難！